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全身暴露染毒与口鼻吸入暴露染毒的对比研究
目的
吸入
暴露染毒
是化学品/**(如,气溶胶、粉尘、复杂混合物等)毒理学和药理学中必不可少的研究方法。典型的吸入暴露染毒研究系统,有全身暴露染毒和口鼻式吸入暴露染毒两种方法,但口鼻式吸入暴露染毒方法中,动物固定器对实验造成的负面影响尚无统一意见。我们利用多用途笼式吸入暴露染毒系统(MIC系统,Shibata)开展全身暴露染毒与口鼻吸入暴露染毒的对比研究,努力阐述口鼻吸入暴露染毒中,动物固定器给动物带来的压力影响。
方法
采用多用途笼式吸入暴露染毒系统(MIC系统,Shibata公司,详细信息参考
www.bio-launching.com
)(Pic.1)用于动物全身暴露染毒和口鼻吸入暴露染毒实验。
多用途笼式吸入暴露染毒系统,型号MIC-6
动物
雄性大鼠:6周的SD大鼠(Japan SLC, Inc., Shizuoka, Japan),1周到检疫隔离,动物被随机分配成3组(每组10只),分别同时进行全身暴露染毒(WBE)和口鼻吸入暴露染毒(NSE)(Pic.2).
图 2:
大鼠被分为3组(2组暴露染毒,1组对比试验)
全身暴露染毒(WBE)(顶部-左侧)和口鼻暴露染毒(NSE)(顶部-右侧).
三组染毒笼同时进行实验
实验设计
实验室恒定条件为空气为23 °C, 55 % 相对湿度 (RH),通气6rph,进行4周实验,动物每天暴露6小时,每周进行5天实验,共进行4周。每个NSE动物在实验时,被放置与透明塑料材质动物固定器内(Shibata公司)。暴露气体为通过MIC分配过多实验室空气。每笼的气体流量控制在15L/min。 (Fig.1)
观察和病理检查
笼内的温度与湿度每次实验都进行实时测量,食物消耗量每周统计一次,动物体重前两周每天测量一次,然后变成2天一次。*后统计的数据有动物体重,器官重量(胸腺、心脏、肺、肝、肾、肾上腺、睾丸等)。
结果
腔室内温度
温度恒定在24 °C,相对湿度保持在66.6±7.3 %RH,在实验后期每天下降到63.7±7.3 %RH
体重和食物消耗量
从第6天开始,与WBE组相比较,NSE组动物体重有变低,从第15天开始,有显著的统计学意义(P<0.01)。同时在食物消耗量上,WBE组、NSE组以及控制组没有显著变化(表格.1, Fig.2)
器官称重
NSE组与WBE组相比较,心脏和胸腺重量(**)统计上显著较低,肾脏重量(**)统计上显著较高,睾丸重量和肾上腺重量(相对)统计上显著较高。
讨论
在口鼻吸入暴露染毒中,关于动物固定(或限制)压力对动物的影响一直备受关注,其影响情况也一直在讨论中,以往的报告中,长期实验过程中会产生约10%的体重抑制,我们的此次实验结果也验证了这一情况。同时我们的实验还显示,限制压力会对动物胸腺和肾上腺造成显著影响,这是以往报道中没有关注的。
在OECD的实验指导中建议使用NSE方式进行实验,但是也指出了WBE方法的必要性,通过使用新型MIC系统对全身暴露染毒与口鼻吸入暴露染毒的对比研究的研究,我们发现其不仅能进行WBE的低剂量实验,同时也可以通过动物固定器的使用进行NSE的实验,其实验结果与传统口鼻吸入暴露染毒系统表现一致性。同时,它在剂量的使用,对WBE或NSE以及两者混合照组设计上都具有非常大的灵活性,仅仅通过简单的修改和组合即可完成传统实验方法花费巨大时间和财力方能达到的效果。
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